Trabajo final para obtención de título: Bioquímico/a

La emergencia de bacterias productoras de carbapenemasas representa un gran problema debido a que presentan mecanismos de resistencia frente a los antibióticos carbapenémicos, que conforman la última línea de la familia de los betalactámicos. Las carbapenemasas se clasifican según el sistema de Ambler en función de su secuencia de aminoácidos en clases A, B y D. Las de clase A (GES y KPC) son inhibidas por el ácido clavulánico; las de clase B o metalo β lactamasas (como las VlM, IMP y NDM) son inhibidas por el ácido etilen-diamino-tetra-acético (EDTA), y las de clase D no se ven afectadas por el ácido clavulánico o el EDTA.
En la provincia de Misiones, la utilización de plantas como tratamientos terapéuticos se encuentra instalada fuertemente en la cultura popular, por lo que las especies autóctonas son una buena opción para la búsqueda de principios activos. Los principios activos de llex paraguariensis pueden ser utilizados para la síntesis de nuevos medicamentos.
En el presente trabajo se investigó la actividad antibiótica de los extractos etanólicos de hojas de I. paraguariensls para establecer la Dilución lnhibitoria Mínima (DlM), Concentración lnhibitoria Mínima (ClM), y Concentración Bactericida Mínima (CBM) sobre cepas clínicas gramnegativas productoras de carbapenemasas. Los extractos fueron obtenidos a partir de hojas no tratadas térmicamente (temperatura ambiente) y con pretratamientos a diferentes temperaturas y tiempos (50'c 30', sO'c 60', 80'c 30ºy g0'c 50'). La evaluación de la actividad antibacteriana se realizó a partir de la determinación de la DIM por el método de difusión en agar y la determinación de la CIM y CBM por el método de microdilución en caldo, sobre cepas clínicas de bacilos gramnegativos productores de carbapenemasas. Las pruebas ensayadas determinaron que los extractos etanólicos de I. paraguariensis tuvieron actividad en dos cepas clínicas, Klebsiella pneumonioe productora de KPC y Proteus vulgaris productor de MBL. Los valores de Concentración lnhibitoria Mínima (ClM) para K. pneumoniae productora de KPC fueron de 1 mg/ml para el extracto etanólico tratado a 50"C 30', de 0,2S mg/ml para el extracto etanólico tratado a 80'C 30' y de 0,5 para el extracto etanólico tratado a 80'C 60'. Los valores de Concentración Bactericida Mínima resultaron idénticos a los de ClM. Los valores de Concentración inhibitoria Mínima (ClM) P. vulgaris productora de MBL fueron de 0,125 mg/ml para el extracto etanólico tratado a temperatura ambiente, a 50º C 30' y a 8o"c 3o', y de 0,5 para los extractos etanólicos tratados a 50"C 60'y a 8O"C 5O'. Los valores de CBM resultaron idénticos
a los de CIM. En ambas especies sensibles los extractos tratados a 80'C 30' presentan los valores menores de ClM.
Se concluyó que los extractos etanólicos de I. paraguariensis presentaron actividad antibiótica frente a cepas clínicas productoras de carbapenemasas. Los valores de DIM obtenidos para ambas cepas tuvieron una buena correlación con los valores de CIM y CBM, siendo el extracto tratado a 80'C y 30 minutos el más eficaz para ambas cepas teniendo en cuenta que presentó valores de CIM más bajos en ambas especies. De esta forma, los extractos de I. paraguariensis St. Hil constituyen una posible alternativa terapéutica como potencial fármaco antibiótico, siendo necesario continuar con nuevas investigaciones que identifiquen puntualrnente los componentes y fracciones moleculares.