Trabajo final para obtención de título: Bioquímico/a

Candida parapsilosis sensu lato (s.l.) es un complejo de levaduras oportunistas que incluye 3especies íntimamente relacionadas: C. parapsilosis sensu stricto (s.s.), C. orthopsilosis y C. metapsilosis. Es considerado un importante patógeno emergente, típicamente comensal de la piel humana, razón por la que se encuentra asociada a una amplia gama de entidades clínicas, desde infecciones superficiales hasta infecciones sistémicas que pueden llegar a comprometer la vida del paciente. A pesar de que C. parapsilosis s.l. a menudo se considera menos virulenta que C. albicans, es la especie Candida con mayor aumento en incidencia desde 1990. Los brotes de candidemia por C. parapsilosis s.l. en humanos ha sido asociado con la presencia de dispositivos implantados, gracias a su capacidad para formar biopelículas; afectando principalmente a pacientes inmunosuprimidos. La variabilidad genética del complejo C. parapsilosis s.l. crea la necesidad de utilizar un método de identificación a nivel de especie. En este contexto, la amplificación al azar de ADN polimórfico mediante la reacción en cadena de la ADNpolimerasa (RAPD-PCR) es útil para la tipificación y evaluación de la variabilidad genética de hongos.
El objetivo de este trabajo fue identificar mediante la amplificación de intrón RPS0 las especies del complejo C. parapsilosis s.l., proveniente de procesos infecciosos en humanos.
Se emplearon protocolos de identificación macro y micromorfológico para cepas provenientes de muestras clínicas, extracción y purificación de DNA, genómico, y amplificación mediante la RAPD-PCR del intrón RPS0 utilizando oligonucleótidos especie específicos.
Se logró recuperar cepas del Complejo C. parapsilosis s.l. provenientes de muestra clínicas, según su macro y micrommorfología. Se consiguió amplificar el intrón RPS0, optimizando dicha técnica a una temperatura de hibridación de 30ºC, siendo identificadas las especies C. parapsilosis s.s., C. orthopsilosis y C. metapsilosis.
En este trabajo, la técnica RAPD-PCR ha mostrado ser útil en la identificación de las especies del complejo C. parapsilosis s.l.
La identificación de C. parapsilosis s.l. en muestras clínicas a nivel de especies, es importante para mejorar la terapia antimicótica, la asistencia al paciente y para prevenir la aparición de resistencia a los medicamentos.