Trabajo final para obtención de título: Bioquímico/a

La enfermedad de chagas constituye un serio problema sanitario y social en gran parte del continente americano. Se extiende desde el norte de México, hasta el sur de Argentina y Chile, en zonas donde existen los triatominos domiciliados. En la actualidad, habría en el mundo más de 20 millones de infectados. Se ha estimado que para Latinoamérica cerca de 10 millones de personas permanecen hoy infectados por el T. cruzi, con una incidencia anual de 40 mil casos vectoriales, 12 mil decesos anuales. Además 100 millones de personas estarían en riesgo de contraer la infección. En los países del cono sur se calcula que el total de la población infectada es de alrededor de 4.5 millones de individuos. El número de infectados en la Argentina es controvertido, de acuerdo a estimaciones del año 2005, el número de infectados chagásicos sería de 1.6 millones de individuos, de los cuales 300.000 presentarían cardiopatías y aproximadamente cerca de 7.3 millones de individuos viven con el riesgo de infectarse, por lo que se considera la principal endemia del país (OPS/OMS, 2006). En la provincia de Misiones se certificó la interrupción de la transmisión vectorial del T. cruzi en el año 2012, esto implica que no se hallaron nuevos casos de Chagas, y que hay pocas vinchucas y pocas casas con presencia del insecto para que se concrete la transmisión vectorial de la enfermedad.
La enfermedad de Chagas es una zoonosis causada por un protozoo flagelado, el Trypanosoma cruzi. Este parasito normalmente se transmite al ser humano y a otros mamíferos a través de insectos hemípteros hematófagos, conocidos en Argentina como Vinchucas o chinches. En el hombre, la infección puede ser congénita o adquirida y tiene un curso clínico variable, que va desde una infección asintomática hasta una enfermedad crónica severa con compromiso cardiovascular y/o gastrointestinal. El reservorio natural lo constituyen los armadillos, marsupiales, murciélagos, ratas y primates silvestres, además de animales domésticos.
- Objetivo general: Realizar diagnóstico molecular mediante PCR convencional de T. cruzi en triatominos capturados en el sur de la Provincia de Misiones.
Objetivos específicos:
• Ajuste a las condiciones del laboratorio de una técnica de PCR convencional para detectar T. cruzi en triatominos.
• Aplicar la técnica PCR convencional para diagnóstico de portación de T. cruzi en triatominos capturados en campo.
• Comparar los resultados obtenidos con la PCR convencional y la microscopia óptica.
• Transferencia de la experiencia a personal a cargo de la vigilancia epidemiológica.
El presente trabajo es de naturaleza descriptiva, y pretende ajustar a las condiciones de laboratorio una técnica de PCR para identificar T. cruzi en deyecciones de triatominos utilizando los cebadores TCZ1/TCZ2, además identificar ADN de T. cruzi en triatominos capturados en campo, en el sur de la provincia de Misiones. Se consideró zona sur a los departamentos que se encuentran por debajo del paralelo 27° latitud sur, donde se incluyen los departamentos de: Leandro N. Alem; San Ignacio; Candelaria y Oberá, esto comprende:
1) dos ejemplares adultos de T. infestans capturados durante el año 2012 en una vivienda rural del municipio de V. O. Andrade departamento de Leandro N. Alem, utilizados para ajustar la técnica de PCR.
2) un total de 15 ejemplares de Triatoma infestans entre los cuales incluyeron 11 adultos y 4 ninfas, capturados en los departamentos de Leandro N. Alem (O.V. Andrade) y Oberá (Colonia Alberdi) de la Provincia de Misiones durante los años 2014 y 2015.
Se ajustó a las condiciones del laboratorio una técnica de PCR, para identificar ADN de T. cruzi a partir de heces de triatominos, pudiendo aportar una herramienta mas tanto en el diagnóstico como en la certificación de la interrupción de la transmisión vectorial en la Provincia de Misiones.
Conclusiones:
• Se aplicó la técnica de PCR convencional en 15 triatominos capturados en el sur de la Provincia de Misiones durante el periodo 2014-2015, resultando todas negativas, lo que indicaría la ausencia de portación de infección natural de los triatominos en la zona en estudio.
• En el presente estudio se observó que utilizando la técnica de PCR convencional se obtuvieron los mismos resultados que los obtenidos por microscopia óptica, por lo tanto resulta una buena opción seguir implementando la microscopia para el diagnostico de rutina, ya que resulta un método más rápido, de menor costo y con menor requerimiento en equipamiento e infraestructura para la detección del parásito en las deyecciones de estos insectos.
• Se trabajó en conjunto con la Dirección de Saneamiento ambiental contribuyendo al diagnostico de T. cruzi, al control del funcionamiento de la vigilancia epidemiológica, y se planificó la continuidad del trabajo con el fin de obtener un mayor número de muestras.