Trabajo final para obtención de título: Bioquímico/a

La Leishmaniasis Visceral (LV) es una enfermedad zoonótica producida por el protozoario Leishmania spp, transmitida por el flebótomo Lutzomya longipalpis. El diagnóstico clínico es dificultoso; las técnicas específicas de laboratorio brindan la especificidad para la confirmación. El seguimiento del paciente desde ambos puntos de vista es importante porque permite identificar pacientes en riesgo de recaída, recaídas tempranas y curación.
Con el objetivo de conocer la situación clínico-epidemiológica de una población del departamento Capital en la que se efectuó el diagnóstico de LV durante el período 2006-2011 e implementar la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) para la detección de anticuerpos anti-Leishmania infantum se encaró el presente trabajo. La búsqueda de casos se efectuó en la base de datos de la Dirección de Atención Primaria de la Salud del Ministerio de Salud Pública. Se estableció contacto con los pacientes mediante la búsqueda personal y telefónica. A los pacientes que dieron su consentimiento se efectuó extracción de sangre para la realización de análisis de laboratorio (células sanguíneas y función hepática), búsqueda de anticuerpos específicos por IFI e inmunocromatografía rk39. Se implementó la técnica de IFI basada en el procedimiento del Instituto de Salud Carlos III (ISCIII). Los datos de los pacientes estudiados fueron cargados en un protocolo elaborado al efecto; los resultados se registraron en una base de datos Excel (Microsoft Office 2007).
El diagnóstico de LV afectó más a los grupos etarios < 15 años y a los adultos en un rango entre 46-60 años, se presentó con una relación V: M 4:1. Se halló que el 67% de los casos fueron diagnosticados hace más de cinco años, observándose a partir del año 2009 una disminución en los mismos. Se obtuvieron 14 muestras del total de 39 pacientes diagnosticados en el período estudiado. Para la implementación de la técnica IFI se ajustaron los parámetros para la ejecución de la misma, obteniéndose los resultados esperados con los controles de calidad. Se definieron las siguientes condiciones de trabajo para la metodología de IFI desarrollada. Armado de improntas: se diluyó la solución de antígeno original al 1/2, cargando en cada pcillo 10uL de la misma. Se dejó secar 24hs a temperatura ambiente y se fijaron los promastigotes por flameado a la llama 3 veces. Concentración de reactivos y controles titulados: se diluyó el control positivo a título 1/320; el control negativo a título 1/80; el conjugado 1/200. Las diluciones se realizaron con PBS pH 7,2; utilizando el mismo buffer como control de inespecificidad. La concentración final de azul de Evans utilizada fue 0.01%. Las muestras de 7 pacientes fueron reactivas para inmunocromatografía rk39, 2 de estas muestras fueron reactivas en la técnica IFI y mostraron alteraciones en el análisis células sanguíneas (con anemia moderada y leucocitosis leve) y perfil hepático normal. Por otra parte, las muestras de 7 pacientes restantes fueron no reactivas para inmunocromatografía rk39 y para IFI, donde 2 de estas presentaron alterado el perfil hepático (con FASA y ASAT ligeramente elevadas).
Se logró implementar la metodología IFI definiéndose ñas condiciones de trabajo, y presentar los primeros hallazgos de laboratorio de la población hallada. Se observó que la LV en el departamento Capital, afectó mayoritariamente a los varones, a los <15 años y los adultos de 46 a 60 años; y que la mayor parte de los pacientes fueron diagnosticados hace más de 5 años, observándose a partir del 2009 una disminución de los casos.