Scromeda, Gabriela Yanina;
Amplificación del GEN FKSI implicado en mecanismos de resistencia a Equinocandinas en cepas del complejo Candida parapsilosis / Gabriela Yanina Scromeda ; directora Dra. Karina Alejandra Salvatierra y co-director Bqco. Ernesto Velázquez. - Posadas : Universidad Nacional de Misiones. Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales, 2022. - 75 p. : tab. ; gráf. ; fot.
Trabajo final para obtención de título: Bioquímico/a
Durante las últimas décadas las infecciones invasoras por Candida spp han ido en ascenso continuo, representando un problema significativo en el ámbito de la salud en especial en pacientes inmunocomprometidos y población pediátrica, con una alta morbi-mortalidad a pesar de los esfuerzos de la comunidad médica.
C. parapsilosis sensu lato, considerada como un importante patógeno emergente causante de candidemia, es un complejo conformado por tres especies genéticamente relacionadas: C. parapsilosis sensu stricto, C. orthopsilosis y C. metapsilosis a las que se les ha atribuido diferente patogenicidad y diferencias en los perfiles de sensibilidad a antifúngicos. De las tres especies, la primera es la más relevante desde el punto de vista clínico.
Las equinocandinas son un grupo reciente de antimicóticos, de los más utilizados en las candidiasis invasivas. La resistencia frente a estos fármacos es un fenómeno que está emergiendo con gran rapidez, siendo un hecho de suma preocupación. El principal mecanismo de resistencia se atribuye a mutaciones en las regiones hot spot de los genes FKS, que codifican la fracción catalítica del
complejo enzimatico B-1,3-D-glucano sintetasa, diana de la equinocandina.
El objetivo de este trabajo fue caracterizar fenotípica y genotípicamente las cepas fúngicas del complejo C. parapsilosis s.l., provenientes de aislamientos clínicos recuperadas del cepario de la cátedra de Micología y desarrollar un protocolo para la detección las regiones hot spot del gen FKS1.
Por medio de la utilización de técnicas microbiológicas clásicas, se logró caracterizar fenotípicamente las cepas en estudio. La identificación definitiva se consiguió mediante la amplificación de la región ITS1 - 5.8S - ITS2, su secuenciación y análisis de las secuencias obtenidas empleando herramientas bioinformáticas. Por último, se ensayaron distintas condiciones experimentales y se logró poner a punto un protocolo de PCR para la amplificación de las regiones HS1 y HS2 del gen FKS1 en cepas de C. parapsilosis s.l.
La caracterización fenotípica y genotípica de C. parapsilosís s.l. y el desarrollo de un protocolo para la detección de las regiones hot spot del gen FKSl, permiten identificar y monitorear la emergencia de mutaciones asociadas a resistencia a equinocandinas.
CANDIDA PARAPSILOSIS
EQUINOCANDINAS
MICOLOGÍA
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA
Amplificación del GEN FKSI implicado en mecanismos de resistencia a Equinocandinas en cepas del complejo Candida parapsilosis / Gabriela Yanina Scromeda ; directora Dra. Karina Alejandra Salvatierra y co-director Bqco. Ernesto Velázquez. - Posadas : Universidad Nacional de Misiones. Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales, 2022. - 75 p. : tab. ; gráf. ; fot.
Trabajo final para obtención de título: Bioquímico/a
Durante las últimas décadas las infecciones invasoras por Candida spp han ido en ascenso continuo, representando un problema significativo en el ámbito de la salud en especial en pacientes inmunocomprometidos y población pediátrica, con una alta morbi-mortalidad a pesar de los esfuerzos de la comunidad médica.
C. parapsilosis sensu lato, considerada como un importante patógeno emergente causante de candidemia, es un complejo conformado por tres especies genéticamente relacionadas: C. parapsilosis sensu stricto, C. orthopsilosis y C. metapsilosis a las que se les ha atribuido diferente patogenicidad y diferencias en los perfiles de sensibilidad a antifúngicos. De las tres especies, la primera es la más relevante desde el punto de vista clínico.
Las equinocandinas son un grupo reciente de antimicóticos, de los más utilizados en las candidiasis invasivas. La resistencia frente a estos fármacos es un fenómeno que está emergiendo con gran rapidez, siendo un hecho de suma preocupación. El principal mecanismo de resistencia se atribuye a mutaciones en las regiones hot spot de los genes FKS, que codifican la fracción catalítica del
complejo enzimatico B-1,3-D-glucano sintetasa, diana de la equinocandina.
El objetivo de este trabajo fue caracterizar fenotípica y genotípicamente las cepas fúngicas del complejo C. parapsilosis s.l., provenientes de aislamientos clínicos recuperadas del cepario de la cátedra de Micología y desarrollar un protocolo para la detección las regiones hot spot del gen FKS1.
Por medio de la utilización de técnicas microbiológicas clásicas, se logró caracterizar fenotípicamente las cepas en estudio. La identificación definitiva se consiguió mediante la amplificación de la región ITS1 - 5.8S - ITS2, su secuenciación y análisis de las secuencias obtenidas empleando herramientas bioinformáticas. Por último, se ensayaron distintas condiciones experimentales y se logró poner a punto un protocolo de PCR para la amplificación de las regiones HS1 y HS2 del gen FKS1 en cepas de C. parapsilosis s.l.
La caracterización fenotípica y genotípica de C. parapsilosís s.l. y el desarrollo de un protocolo para la detección de las regiones hot spot del gen FKSl, permiten identificar y monitorear la emergencia de mutaciones asociadas a resistencia a equinocandinas.
CANDIDA PARAPSILOSIS
EQUINOCANDINAS
MICOLOGÍA
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA